Niezwykłe zalety ultraczułego testu ELISA z cyklem Thio-NAD w określaniu białka dengi NS1

1. Wprowadzenie

Gorączka denga jest ostrą chorobą zakaźną wywoływaną przez Wirus dengiprzez ukąszenie zakażonego komara z gatunku Aedes (Ae. aegypti lub Ae. albopictus), z głównymi objawami, takimi jak wysoka gorączka, zawroty głowy, ból głowy, wysypka i Silnybóle (bóle oczu, mięśni, stawów lub kości) itp. Choroba ta jest szeroko rozpowszechniona w klimacie tropikalnym i subtropikalnym. Szacuje się, że każdego roku od 100 do 400 milionów ludzi jest zarażonych, z czego ponad 80% jest zwykle łagodnych i bezobjawowych. Niemniej jednak ciężka gorączka denga może zwiększać ryzyko śmierci, jeśli nie jest odpowiednio leczona. Dlatego wczesna diagnoza tej choroby ma znaczenie dla jej szybkiego leczenia.

Warto zauważyć, że niestrukturalne białko 1 (NS1), wysoce konserwatywna glikoproteina, jest wydzielane głównie podczas infekcji Denga wirus, który jest intensywnie uważany za główny czynnik patogenezy Denga. W związku z tym NSI jest powszechnie stosowany jako biomarker do wczesnego wykrywania tej choroby.

W tym badaniu test immunoenzymatyczny sprzężony z kanapką(ELISA)W połączeniu z dinukleotyd tionikotynamidoadeninowy (tio-NAD/S-NAD) Metoda cykliczna (Zwana dalej ultraczułą ELISA) jest wykorzystywany do wykrywania NSI, a następnie porównywania z NAAT w celu potwierdzenia jego dokładności wykrywania.

2. Zalety i wady tradycyjnych metod wykrywania Denga 

W chwili obecnej tOto cztery główne metody wykrywania dla Denga.


Izolacja i identyfikacja wirusa mają wysoką specyficzność, ale są czasochłonne i trwają co najmniej 5 dni. Szybki test antygenowy jest najszybszy i najbardziej opłacalny spośród innych metod, ale czułość i swoistość są stosunkowo niskie. Test serologiczny oparty na IgM i IgG jest ograniczony liczbą dni zakażenia, ponieważ ten Test należy odłożyć do momentu, gdy poziom przeciwciał wzrośnie do wykrywalnego poziomu.

W klinice NAAT jest często stosowany do określenia Dengaprzez zabrudzenia o wysokiej wrażliwości i specyficzności. Jednak ta metoda jest kosztowna, pracochłonna i podatna na fałszywe pozytywne nastawienie, które musi być przeprowadzone przez przeszkolony personel. Aby przezwyciężyć wady tych metod, opracowano nową metodę wykrywania ultraczuły test ELISA wynosi zastosowane w tym badaniu.

3. Przebieg ultraczułego testu ELISA z cyklem tio-NAD

Para przeciwciał jeststosowany do wychwytywania białka NS1 w teście ELISA typu sandwich oraz fosfatazy alkalicznej jestznakowane na przeciwciałie drugorzędowym. Oprócz przeciwciał pochodna androsteronu, dehydrogenaza 3α-hydroksysteroidowa, tio-NAD i NADH sąsłuży do budowy systemu cykli enzymów tio-NAD. Podczas reakcji cyklicznej tio-NAD, tio-NADH stale gromadził się w kształcie liczby trójkątnej i mógł być bezpośrednio mierzony przy absorbancji 405 nm.

4. Porównanie ultraczułych testów ELISA i NAAT w wykrywaniu białka dengi NS1

W NAAT 60 próbek jest dengologicznie dodatnich, a 25 jest dengą-ujemnych. Wartość progu cyklicznego NAAT (CT) tych próbek z dodatnim wynikiem dengi wahała się od 12,42 do 31,41. W ultraczułym teście ELISA 59 próbek jest odpowiednio dodatnich w stosunku do wyników NAAT, podczas gdy 25 próbek jest całkowicie odpowiednio ujemnych w stosunku do wyników NAAT.

W porównaniu z NAAT, czułość i swoistość ultraczułego testu ELISA wynoszą odpowiednio 98,3% i 100% (Tabela 2). Spośród 60 potwierdzonych przez NAAT próbek pacjentów z dengą, tylko 1 próbka jest ujemna w ultraczułym teście ELISA. Dane NAAT wykazały, że próbka jest przypadkiem zakażenia DENV typu 4 z wartością CT 21,59. Wyniki ultraczułego testu ELISA są prawie idealnie zgodne z wynikami NAAT, z wartością kappa 0,972 (95% CI: 0,917-1.0).

5. Wnioski

Ultraczuła metoda ELISA jest łatwa do wykonania i nie wymaga profesjonalnych stażystów do obsługi. Detekcję można rozpocząć natychmiast po otrzymaniu małej próbki. Jest szczególnie przydatny do wczesnego wykrywania choroby denga w krajach o niskich dochodach.

Odniesienie

Chen, Po-Kai i in. "Zaawansowana metoda wykrywania białka NS1 dengi przy użyciu ultraczułego testu ELISA z cyklami tio-NAD". Wirusy, tom 15,9, 1894. 8 wrz 2023, doi:10.3390/v15091894

Zalety produktu i cechy BONTAC Thio-NAD/S-NAD

BONTAC (BONTAC) jest ojedno z niewielu przedsiębiorstw w Chinyktóre mogą wytwarzać Tio-NADz "Bonzyme"Metoda całoenzymatyczna(przyjazny dla środowiska;brak szkodliwych pozostałości rozpuszczalników) oraz unikalna siedmiostopniowa technologia oczyszczania "Bonpure". BONTAC łączy prace badawczo-rozwojowe, produkcję i sprzedaż, z własne fabryki i szereg międzynarodowych certyfikatów zapewniających wysoką jakość i stabilne dostawy produktów.

Zrzeczenie się

BONTAC nie ponosi odpowiedzialności za jakiekolwiek roszczenia wynikające bezpośrednio lub pośrednio z polegania na informacjach i materiałach zawartych na tej stronie internetowej.