1. Wprowadzenie

Suplementacjamononukleotyd nikotynamidowy (NMN)w celu zwiększeniapoziomzdinukleotyd nikotynamidoadeninowy (NAD+)został ujawniony jako obiecująca interwencja przeciwstarzeniowa. Nadal jednak jest topoważnym wyzwaniem jest dokładneilościowe określanie półproduktów NAD+, Numer NMN Nowy rok. Niniejsze badanie ma na celu wprowadzenie nowatorskiej metody, metodologii LC-MS/MS za pośrednictwem podwójnych izotopów (dimeLC-MS/MS), do precyzyjnego oznaczania ilościowegoNumer NMN w próbkach biologicznych.

2. Czynniki wpływające na dokładne wykrywanie NMN

NMN jest trudny do dokładnego wykrycia ze względu na jego podatność na działanie enzymatycznedegradacja, konwersja w przetwarzaniu próbki, jej złożone zachowanie w różnych warunkach kolumnowych i ekstrakcyjnych, a także efekt matrycy.


W szczególności NMN ma właściwości wysokiej polarności i niskiej lotności, która jest łatwa do rozpuszczenia w wodzie, ale trudna do rozpuszczenia w rozpuszczalnikach organicznych. Właściwości te znacznie ograniczają zastosowanie wielu konwencjonalnych metod analizy ilościowej.

BPróbki iologicznejakkrew przenosi znaczącą aktywność CD38 i CD73 (ekto-5'-nukleotydaza), z których oba mogą wykorzystywać NMN jako substrat.

Zachowanie NMN w kolumnie jest bardzo złożone, prawdopodobnie ze względu na dwudzielny charakter jego ładunków, tak że subtelne różnice w warunkach ekstrakcji i kolumny znacząco wpływają na niezawodne i dokładne wykrywanie NMN.

3. Strategie radzenia sobiedimeLC-MS/MSw celu zmniejszenia wpływu czynników wpływu

Aby uniknąć zakłóceń powodowanych przez wyżej wymienione czynniki, pTyp rotacyjnykolumnaNMN-2jest stosowany. Ta kolumnazawieraćsCząsteczki krzemionki o wysokiej czystości na bazie C18które są bardziej zdolne do wiązania związków hydrofilowych niż cząsteczki węgla, poprawiając zdolność separacji.

Pkwas erchlorowy (PCA)jest zatrudniony, ponieważ możeskutecznie wyodrębnij NAD + i NMN z próbek biologicznych, takich jak osocze o minimalnym straty.

Aby dostosować efekty macierzy,austalonej ilości (1 μM) każdego związek izotopowyjas dodano dobiologicznypróbki przed ekstrakcją PCA.

4. ZaletasdimeLC-MS/MS

Dwzorce izotopowe NMN, NMN (M + 14) i NMN (M + 5), w metodologii LC-MS/MS-driven może precyzyjnie prześledzić losy NMN podczas przetwarzania próbkiktóryznacznie zwiększa dokładność i wiarygodność pomiaru NMN w próbkach biologicznych. Poza tym dimeLC-MS / MS może oceniać wydajność ekstrakcji i bezwzględne stężenia NMN w różnych typach próbek biologicznych.

5. Wnioski

Thjestnowy LC-MS/MS-Metodologia oparta na podwójnych izotopowych wzorcach NMN puszkaAccuraTo nie jest tak, że nieoraz reliabLyzmierzyć NMN w próbkach biologicznych. Może być wykorzystany do przyszłych badań nad spożyciem NMN.

6. Odniesienie

Unno, Junya et al. "Bezwzględna kwantyfikacja mononukleotydu nikotynamidu w próbkach biologicznych za pomocą podwójnej chromatografii cieczowej za pośrednictwem tandemowej spektrometrii mas (dimeLC-MS/MS)." npj starzenie vol. 10,1 2. 2 stycznia 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1

Dlaczego warto wybraćBONTAC?

BONTACjest światowym lideremNumer NMNprzemysł. Mamy pierwszą w Chinach technologię katalizy całego enzymu i staliśmy się wiodącym przedsiębiorstwem w Chinach produkty koenzymowe, które są szeroko stosowane w przemyśle zdrowotnym, medycznym i kosmetycznym,zielone rolnictwo, biomedycyna i inne dziedziny.SzczególnościBONTAC jest Numer NMNdostawca surowców dla słynnego zespołu Davida Sinclaira z Uniwersytetu Harvarda. Nasze usługi i produkty są godne zaufania. PonadtoBONTACMaNiezależnakoenzym Centrum Badań Technologii Inżynieryjnych na poziomie wojewódzkim w Chinach oraz własne fabryki, w których można zapewnić czystość i stabilność produktów.

Zrzeczenie się

ThjestArtykuł jest na podstawie odniesienie wczasopismo naukowe. Istotne informacje znajdują siędostarczaćwyłącznie w celach związanych z udostępnianiem i uczeniem się i nie stanowi porady medycznej. W przypadku jakichkolwiek naruszeń prosimy okontaktAutordladeletjon. Poglądy wyrażone w tym artykule nie reprezentują stanowiskaBONTAC.