Naukowa metoda ilościowego oznaczania NMN w próbkach biologicznych
1. Wprowadzenie
Suplementacja mononukleotyd nikotynamidu (NMN) w celu zwiększenia poziomu dinukleotydu nikotynamidoadeninowego (NAD +) okazało się obiecującą interwencją przeciwstarzeniową. Jednak dokładne ilościowe określenie produktów pośrednich NAD + nadal stanowi poważne wyzwanie, Stacja NMN Nowy rok. Badanie to ma na celu wprowadzenie nowatorskiej metody, metodologii LC-MS/MS z podwójnym pośrednictwem izotopów (dimeLC-MS/MS), w celu precyzyjnego ilościowego określenia Stacja NMN w próbkach biologicznych.
2. Czynniki wpływające na dokładne wykrywanie NMN
NMN jest trudny do dokładnego wykrycia ze względu na jego podatność na degradację enzymatyczną, konwersję w przetwarzaniu próbki, jego złożone zachowanie w różnych warunkach kolumny i ekstrakcji, a także efekt matrycy.
W szczególności NMN ma właściwości wysokiej polarności i niskiej lotności, która jest łatwa do rozpuszczenia w wodzie, ale trudna do rozpuszczenia w rozpuszczalnikach organicznych. Właściwości te znacznie ograniczają zastosowanie wielu konwencjonalnych metod analizy ilościowej.
BPróbki iologiczne jakkrew przenosi znaczącą aktywność CD38 i CD73 (ecto-5’-nukleotydaza), z których oba mogą wykorzystywać NMN jako substrat.
Zachowanie NMN w kolumnie jest bardzo złożone, prawdopodobnie ze względu na dwuczęściowy charakter jego ładunków, tak że subtelne różnice w warunkach ekstrakcji i kolumny znacząco wpływają na niezawodne i dokładne wykrywanie NMN.
3. Strategie radzenia sobie dimeLC-MS/MSw celu ograniczenia wpływu czynników oddziaływania
Aby uniknąć zakłóceń wyżej wymienionych czynników, zastosowano prototypową kolumnę NMN-2. Ta kolumna zawiera cząstki krzemionki o wysokiej czystości na bazie C18, które są bardziej zdolne do wiązania związków hydrofilowych niż cząstki węgla, poprawiając zdolność separacji.
Stosuje się kwas nadchlorowy (PCA), ponieważ może on skutecznie ekstrahować NAD + i NMN z próbek biologicznych, takich jak osocze, przy minimalnych stratach.
Aby skorygować efekty matrycowe, przed ekstrakcją PCA dodaje się stałą ilość (1 μM) każdego związku izotopowego do próbek biologicznych.
4. Zaletaswymiarów LC-MS/MS
Podwójnie izotopowe wzorce NMN, NMN (M + 14) i NMN (M + 5), w metodologii opartej na LC-MS/MS-driven mogą precyzyjnie śledzić losy NMN podczas przetwarzania próbki, co znacznie zwiększa dokładność i wiarygodność pomiaru NMN w próbkach biologicznych. Poza tym dimeLC-MS / MS może oceniać wydajność ekstrakcji i bezwzględne stężenia NMN w różnych typach próbek biologicznych.
5. Wnioski
Thjestnowy LC-MS/MS-Metodologia oparta na podwójnych izotopowych wzorcach NMN może dokładnie i niezawodnie mierzyć NMN w próbkach biologicznych.Może być wykorzystany do przyszłych badań nad spożyciem NMN.
6. Odniesienie
Unno, Junya i in. "Bezwzględna kwantyfikacja mononukleotydu nikotynamidu w próbkach biologicznych za pomocą chromatografii cieczowej z podwójnym izotopem - tandemowa spektrometria mas (dimeLC-MS/MS)." npj starzenie się vol. 10,1 2. 2 stycznia 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Dlaczego warto wybrać BONTAC (BONTAC)?
BONTAC (BONTAC) jest liderem światowego rynku Stacja NMN przemysł. Mamy pierwszą technologię katalizy pełnoenzymatycznej w Chinach i staliśmy się wiodącym przedsiębiorstwem w zakresie produktów koenzymatycznych, które są szeroko stosowane w przemyśle zdrowotnym, medycynie i urodzie, zielonym rolnictwie, biomedycynie i innych dziedzinach. Warto zauważyć, że BONTAC jest Stacja NMN dostawca surowców dla słynnego zespołu Davida Sinclaira na Uniwersytecie Harvarda. Nasze usługi i produkty są godne zaufania. Ponadto BONTAC (BONTAC) posiada niezależne centrum badań nad technologią inżynierii koenzymatycznej na poziomie prowincji w Chinach oraz własne fabryki, w których można zapewnić czystość i stabilność produktów.
Zrzeczenie się
Thjest Artykuł jestNa podstawie odniesienie wczasopismo naukowe. Istotne informacje są następujące: dostarczać wyłącznie w celach informacyjnych i edukacyjnych i nie stanowią żadnych celów porad medycznych. W przypadku jakichkolwiek naruszeń prosimy o kontaktAUTOR dladelet (delet)jon. Poglądy wyrażone w niniejszym artykule nie reprezentują stanowiska BONTAC (BONTAC).