Metoda naukowa ilościowego określania NMN w próbkach biologicznych
1. Wprowadzenie
UzupełnianieMononukleotyd nikotynamidu (NMN)aby podwyższyćpoziom ofNikotynamid adenininowy (NAD+)została przedstawiona jako obiecująca interwencja przeciwstarzeniowa. Jednak nadal jest poważne wyzwanie dla precyzyjnejilościowo określić NAD+ pośrednie, NMN w szczególności. Badanie to ma na celu wprowadzenie nowatorskiej metody, podwójnie izotopowej LC-MS/MS (DIMELC-MS/MS), do precyzyjnej ilościowej identyfikacjiNMN w próbkach biologicznych.2. Czynniki wpływające na dokładne wykrywanie NMN
NMN jest trudne do dokładnego wykrycia ze względu na podatność na enzymatycznedegradacja, konwersja podczas przetwarzania próbek, jej złożone zachowania w różnych warunkach kolumnowych i ekstrakcji oraz efekt macierzowy.
Konkretnie, NMN posiada właściwości wysokiej polaryzacji i niskiej lotności, które łatwo rozpuszcza w wodzie, ale trudno rozpuszczać w rozpuszczalnikach organicznych. Te właściwości znacznie ograniczają zastosowanie wielu konwencjonalnych metod analizy ilościowej.
BPróbki jologicznetakie jak krew niesie istotne aktywności CD38 i CD73 (ekto-5’-nukleotidaza), z których oba mogą wykorzystywać NMN jako podłoże.
Zachowanie NMN w kolumnie jest bardzo złożone, prawdopodobnie ze względu na dwudzielny charakter ładunków, przez co subtelne różnice w ekstrakcji i warunkach kolumny znacząco wpływają na niezawodne i dokładne wykrywanie NMN.
3. Strategie radzenia sobie zdimeLC-MS/MS aby zmniejszyć wpływ czynników wpływu
Aby uniknąć interferencji powyższych czynników, pRototypkolumnaNMN-2 jest stosowana. Ta kolumnazawieraćs Cząstki krzemionki o wysokiej czystości na bazie C18 które są bardziej zdolne do wiązania związków hydrofilowych niż cząstki węgla, poprawiając zdolność separacji.PKwas erchlorowy (PCA) jest wykorzystywany, ponieważ może efektywne wyodrębnianie NAD+ oraz NMN z próbek biologicznych, takich jak plazma, z minimalną Straty.
Aby uwzględnić efekty macierzowe,a Stała ilość (1 μM) każdego z nich Związek izotopowyis dodane dobiologiczne próbki przed ekstrakcją PCA.
4. Przewagas dimeLC-MS/MS
Dstandardy izotopowe NMN zewnętrzne, NMN (M + 14) i NMN (M + 5) w metodologii LC-MS/MS mogą precyzyjnie śledzić losy NMN podczas przetwarzania próbek, któreznacząco zwiększa dokładność i wiarygodność pomiarów NMN w próbkach biologicznych. Ponadto dimeLC-MS/MS może oceniać efektywność ekstrakcji oraz bezwzględne stężenia NMN w różnych typach próbek biologicznych.
5. Podsumowanie
Thjest nowy LC-MS/MS-Metodologia sterowana z podwójnymi izotopowymi standardami NMN czy accurately oraz reliably mierz NMN w próbkach biologicznych. Może być wykorzystywany w przyszłych badaniach nad przyjmowaniem NMN.6. Przypisy
Unno, Junya i in. "Bezwzględna ilościowa ilościowość mononukleotydu nikotynamidu w próbkach biologicznych za pomocą podwójnej izotopowej chromatografii cieczowej za pomocą tandemowej spektrometrii mas (dimeLC-MS/MS)." NPJ starzenie, tom 10,12. 2 stycznia 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Dlaczego warto wybraćBONTAC?
BONTACjest liderem globalnegoNMNprzemysł. Posiadamy pierwszą technologię katalizy enzymatycznej w Chinach i staliśmy się wiodącym przedsiębiorstwem w tej dziedzinie Produkty koenzymatyczne, szeroko stosowane w przemyśle zdrowotnym, medycynie i kosmetice, zielone rolnictwo, biomedycyna i inne dziedziny. Warto podkreślić,BONTAC to NMNDostawca surowców dla słynnego zespołu Davida Sinclaira z Uniwersytetu Harvarda. Nasze usługi i produkty są godne zaufania. Ponadto,BONTACmaniezależnyKoenzym Centrum Badań Technologii Inżynierskiej na poziomie prowincji w Chinach oraz własnoręcznie prowadzone fabryki, gdzie można zapewnić czystość i stabilność produktów.
