Niezwykłe zalety ultraczułej ELISA z cyklowaniem Thio-NAD w określaniu białka NS1 dla dengi
1. Wprowadzenie
Gorączka denga to ostra choroba zakaźna wywołana przezWirus dengi przez ukąszenie zakażonego gatunku Aedes (Ae. aegypti lub Ae. albopictus) komara,Główne objawy takie jak wysoka gorączka, zawroty głowy, ból głowy, wysypka iciężkie Bóle (ból oczu, mięśni, stawów lub kości) itd. Ta choroba jest powszechna w klimacie tropikalnym i subtropikalnym. Szacuje się, że każdego roku zakaża się od 100 do 400 milionów osób, z czego ponad 80% jest zwykle łagodnych i bezobjawowych. Niemniej jednak ciężka gorączka denga może zwiększać ryzyko śmierci, jeśli nie jest odpowiednio leczona. Dlatego wczesna diagnoza tej choroby jest istotna dla jej terminowego leczenia.Warto zauważyć, że białko niestrukturalne 1 (NS1), wysoce zachowana glikoproteina, jest głównie wydzielane podczas infekcjiDengawirus, który jest intensywnie uznawany za główny czynnik patogenezyDenga. Dlatego NSI jest zazwyczaj stosowany jako biomarker wczesnego wykrywania tej choroby.
W tym badaniu zastosowano immunosorbentny test enzymów kanapkowych powiązany z enzymami (ELISA) w połączeniu zThio nikotynamid adeninowy (thio-NAD/S-NAD)Metoda cyklicza (odtąd nazywane ultraczułą ELISA) jest wykorzystywany do wykrywania NSI, a następnie przeprowadza się porównanie z NAAT w celu potwierdzenia dokładności wykrywania.
2. Zalety i wady tradycyjnych metod wykrywania dlaDenga
Obecnie tOto cztery główne metody wykrywaniadla Denga.
Izolacja z wirusem a identyfikacja jest bardzo specyficzna, ale czasochłonna i zajmuje co najmniej 5 dni. The Antygen szybki Test jest najszybszy i najbardziej opłacalny spośród innych metod, ale czułość a swoistość jest stosunkowo niska. Test serologiczny oparty na IgM i IgG jest ograniczony przez liczba dni infekcji, ponieważtheTest musi zostać opóźniony do osiągnięcia poziomu przeciwciał wzrasta do poziomu wykrywalnego.
W klinice często stosuje się NAAT do określeniaDenga przez brud o wysokiej czułości i specyficzności. Jednak ta metoda jest kosztowna, mozolna i podatna na fałszywe pozytywne nastawienie, które musi być przeprowadzane przez wykwalifikowany personel.Aby przezwyciężyć wady tych metod, wprowadzono nową metodę wykrywaniaultraczuła ELISA jest zastosowałem się w tym badaniu.
3. Przepływ pracy ultraczułej ELISA z cyklem thio-NAD
Para przeciwciałjest używany do wychwytywania białka NS1 w kanapce ELISA oraz fosfatazy alkalicznejjest Oznaczone na przeciwciału wtórnym. Poza przeciwciałami, występują pochodne androsteronu: dehydrogenaza 3α-hydroksysteroidowa, thio-NAD oraz NADHsą Używany do budowy systemu cyklicznego enzymów thio-NAD. Podczas reakcji cyklicznej tio-NAD tio-NADH nieustannie gromadził się w liczbie trójkątnej i można go bezpośrednio zmierzyć przy absorpcji 405 nm.
4. Porównanie ultraczułych ELISA i NAAT w wykrywaniu białka NS1 Dengi
W NAAT 60 okazów jest pozytywnych na dengę, a 25 na dengę negatywnych. Wartość progu cyklicznego (CT) NAAT dla tych okazów pozytywnych na dengę wahała się od 12,42 do 31,41.W ultraczułym ELISA 59 próbek jest odpowiednio pozytywnych względem wyników NAAT, podczas gdy 25 jest całkowicie negatywnych względem wyników NAAT.W porównaniu z NAAT, czułość i swoistość ultraczułego ELISA wynoszą odpowiednio 98,3% i 100% (Tabela 2). Spośród 60 próbek pacjentów z potwierdzonym NAAT na dengę, tylko jedna okaza była negatywna w ultraczułym ELISA. Dane NAAT wykazały, że próbka to przypadek zakażenia DENV typu 4 z wartością tomografii komputerowej 21,59. Wyniki ultraczułego testu ELISA są niemal całkowicie zgodne z wynikami NAAT, z wartością kappa 0,972 (95% CI: 0,917-1.0).
5. Podsumowanie
UMetoda ELISA z intryczucią jest łatwa do wykonania i nie wymaga profesjonalnych praktykantów. TWykrywanie HE można rozpocząć natychmiast po otrzymaniu niewielkiej próbki. Jest szczególnie odpowiedni do wczesnego wykrywaniaDengachoroba w Kraje o niskich dochodach.Bibliografia
Chen, Po-Kai i in. "Zaawansowana metoda wykrywania białka dengue NS1 przy użyciu ultraczułej ELISA z cyklowaniem Thio-NAD." Wirusy, tom 15,9, 1894. 8 września 2023, doi:10.3390/v15091894Zalety i cechy produktuBONTAC Thio-NAD/S-NAD
BONTAC jest oJedno z nielicznych przedsiębiorstw wChiny który może produkować Thio-NAD, z"Bonzyme" Metoda pełna enzymatyczna (przyjazne środowisku; brak szkodliwych pozostałości rozpuszczalników) oraz unikalna siedmiostopniowa technologia oczyszczania "Bonpure". BONTAC łączy badania i rozwój, produkcję oraz sprzedaż z Własne fabryki oraz szereg międzynarodowych certyfikatów zapewniających wysoką jakość i stabilne dostawy produktów.
